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    人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

    日期:2017-03-15 09:11:56 人氣:1031

    應用領域:
    生物產業
    實驗設備:
    檢測樣品:
    重組人白細胞介素
    檢測項目:
    乙腈殘留
    下載地址:

    重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定

    1 儀器配置

    ①磐諾 GC A91 氣相色譜儀,配置 FID 檢測器

    ②自動頂空進樣器(上海/HS-16A)

    2 實驗方法

    2.1 色譜條件

    進樣口:220℃,分流比 10:1

    色譜柱:DB-WAX 30m×0.32mm×0.50ìm,2.4ml/min(恒流模式)

    爐膛:45℃

    FID:250℃,H2 30ml/min,Air 300ml/min,Make-up 30ml/min

    頂空進樣器:平衡溫度 75℃,定量管溫度 100℃,傳輸管溫度 100℃,平衡時間 30min

    2.2 對照品溶液及供試品溶液制備對照品溶液配制精密稱取乙腈 7.8mg  250ml 容量瓶中,蒸餾水定容,作為對照品溶液。供試品溶液配制精密稱取供試品約 0.5g  5ml 容量瓶中,蒸餾水定容,作為供試品溶液。

    2.3 乙腈含量測定

    分別精密量取對照品溶液和供試品溶液各 2ml,置 20ml 頂空瓶中,密封,軋蓋,置頂空進樣器中,測定。

    3 實驗結果

    3.1 重現性試驗

    精密量取 2.2 中所述對照品溶液 2.0ml,共份,置個頂空瓶中,按 2.1~2.3 中方法測定,結果峰面積的相對標準偏差(RSD) 3.08%。

    表 1 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定重現性試驗

    編號

    1

    2

    3

    4

    5

    6

    平均值

     

     

     

     

     

     

     

     

    峰面積

    32.82

    34.95

    32.72

    32.77

    34.82

    33.64

    33.62

    RSD%

     

     

     

    3.08

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

     

    人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

    圖 1 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定重現性試驗

    3.1 線性關系考查

    精密量取對照品溶液 2.0、1.0、0.5、0.2、0.1ml,各 2 份于 10 個頂空瓶中,再分別加入蒸餾水 0、1.0、1.5、1.8、1.9ml 后,密封,軋蓋,置頂空進樣器中,測定。以積分面積為縱坐標,2ml H20 中乙腈含量為橫坐標,線性擬合,回歸方程為 Y=0.5426X+0.04702,相關系數 R2=0.9998。測試結果見表和圖 2。

    重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定線性關系試驗

    編號

    X

     

    Y 峰面積

     

     

    2ml H20 中乙腈含量/ìg

     

     

     

     

    Test-1

    Test-2

    平均值

     

     

     

     

     

    1

    62.4

    34.25

    33.6

    33.93

     

    2

    31.2

    16.73

    17.32

    17.03

     

    3

    15.6

    8.29

    8.16

    8.23

     

    4

    6.24

    3.5

    3.88

    3.69

     

    5

    3.12

    1.71

    1.68

    1.70

     

    回歸方程:Y=0.5426X+0.04702,相關系數 R2=0.9998

     人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

    圖 2 重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定線性關系試驗

    3.3 樣品測定

    參考 2.2 中測試。結果見表 3。

     

     

    表 3

    五批重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定結果

     

     

     

     

     

    供試品批號

    稱樣量/mg

    積分面積

    測定結果

     

     

     

     

    粉劑 20121102

    34.2

    未檢出

    <0.004%

    粉劑 20123012

    36.7

    未檢出

    <0.004%

    粉劑 20121130

    31.9

    未檢出

    <0.004%

    液體 20130303**

    904.8

    1.88

    0.00093%

    液體 20130408**

    524.0

    1.55

    0.0013%

    備注:粉劑樣品,稱量后加入 2.0ml H2O 分析;

    液體樣品,稱量后加入 H2O 定容至 5ml 后,取 2.0ml 分析。

     人體白細胞介素-2中乙腈殘留量測定

    圖 3 五批重組人白細胞介素-2 中乙腈殘留量的測定色譜圖


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